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細(xì)胞染色的方法和步驟

發(fā)布時(shí)間：2021/6/17 9:23:13 閱讀次數(shù)：1097

細(xì)胞的染色一般是為了鑒定細(xì)胞，以下是細(xì)胞染色的方法和步驟：

HE染色

1. 脫蠟復(fù)水：石蠟切片經(jīng)二甲苯Ⅰ、Ⅱ脫蠟各5min，然后放入100%、95%、90%、80%、70%各級(jí)酒精溶液中各3-5min，再放入蒸餾水中3min。
2．染色：切片放入蘇木精中染色約10-30min。
3．水洗：用自來(lái)水流水沖洗約15min。使切片顏色變藍(lán)（或放入堿性水中也可），但要注意流水不能過(guò)大，以防切片脫落。
4．分化：將切片放入1%鹽酸乙醇液中褪色，約2秒至數(shù)十秒鐘。見(jiàn)切片變紅，顏色較淺即可。
5．漂洗：切片再放入自來(lái)水流水中使其恢復(fù)藍(lán)色。
6．脫水Ⅰ：切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各3-5min。
7、復(fù)染：用0.5%伊紅乙醇液對(duì)比染色1-3min。
8．脫水Ⅱ：將切片放入95%乙醇中洗去多余的紅色，然后放入無(wú)水乙醇中3-5min。最后用吸水紙吸干多余的乙醇。
9．透明：切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各3-5min。

10．封藏：中性樹膠封存

Giemsa染色
1.根據(jù)需要量，取8ml雙蒸水，加入姬姆薩原液1ml，再加入姬姆薩稀釋液1ml，再加入姬姆薩稀釋液1ml，混勻即為工作液，此工作液常溫可保存兩周。
2、按常規(guī)方法將石蠟切片脫蠟水化，PBS清洗。
3、將切片放到染色架上，滴加2-3滴染色工作液，使覆蓋全部組織，室溫染色15-30分鐘。

4、用自來(lái)水緩慢從玻片一端沖洗，晾干后鏡檢。