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血清質(zhì)檢方法和重要作用

發(fā)布時(shí)間：2021/6/17 9:25:11 閱讀次數(shù)：521

細(xì)胞培養(yǎng)基的構(gòu)成中動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖起著重要作用。在動(dòng)物血清中牛血清的應(yīng)用又是最廣泛的，所以想要細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中長(zhǎng)的好、穩(wěn)定，牛血清的質(zhì)量好壞直接影響生物研究的質(zhì)量和安全性，使用質(zhì)量好的牛血清也是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)。

血清是提供生長(zhǎng)激素、營(yíng)養(yǎng)物，以及低分子營(yíng)養(yǎng)物；提供結(jié)合蛋白；能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力；是細(xì)胞貼壁、鋪展生長(zhǎng)所需因子的來(lái)源；起酸堿度緩沖液作用；提供蛋白酶抑制劑；細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受損傷；能與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。

      血清分類
      胎牛血清：八月齡胎牛心臟穿刺取血
      新生牛血清：出生12-24小時(shí)新生牛靜脈采血
      小牛血清：出生三月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清
      血清來(lái)源
      來(lái)自國(guó)內(nèi)非疫區(qū)，有說(shuō)明血清來(lái)源的證明資料：包括收集過(guò)程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況。
      血清收集
      胎牛血清是心臟穿刺取血，新生牛（10~14天）和小牛（10個(gè)月內(nèi)）血清靜脈取血。血清在低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存，符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)。
      血清制備
      1、熱滅活血清（非必須）
      2、γ-射線照射：γ－射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。
      3、除菌過(guò)濾：胎牛血清要通過(guò)三層100nm過(guò)濾。
      血清質(zhì)檢方法
      ⑴、化學(xué)檢測(cè)
      A 生化檢測(cè)：膽固醇、甘油三酯、膽紅素、尿素、尿酸、葡萄糖、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、高筒、黃體酮、雌二醇等檢測(cè)
      B 微量元素檢測(cè)：鉀、鈉，鐵、氯化物、鈣、鎂、總鐵結(jié)合力、血清唾液酸等檢測(cè)
      C 蛋白檢測(cè)：白蛋白和球蛋白檢測(cè)
    ⑵、微生物檢查
      ①、細(xì)菌和真菌：直接培養(yǎng)法
      ②、支原體檢測(cè)：培養(yǎng)法，DNA熒光染色
      ③、病毒檢測(cè)：直接熒光抗體檢測(cè)
      牛蘭舌病毒 Bovin blue tongue；
      牛腺病毒 Bovine Adenovirus；
      牛細(xì)小病毒 Bovine Parvovirus；
      牛病毒性腹泄病毒 Bovine Viral Diarhea Virus；
      狂犬病病毒 Rabies；
      呼腸弧病毒 Reovirus；
      牛呼吸道合胞病毒 BRSV；