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細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)染方法和步驟

發(fā)布時(shí)間：2021/6/17 9:26:17 閱讀次數(shù)：1927

一、貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染

       1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板，每孔細(xì)胞數(shù)約為1×105 個(gè)，
       2.第二天，待細(xì)胞貼壁后，換液，
       3.加入1mL完全培養(yǎng)基，再加20 μL 慢病毒，
       4.混勻后繼續(xù)培養(yǎng)，
       5.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài)，并更換為新鮮培養(yǎng)基，
       6.轉(zhuǎn)染1周后，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，中途可以換液，保持細(xì)胞的活性,

7.當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)滿板底后，傳代至T25培養(yǎng)瓶中。

       二、懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
       1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板，每孔細(xì)胞數(shù)約為3×105 個(gè)，
       2.第二天，換液后加入1mL完全培養(yǎng)基，再加20 μL 慢病毒，
       3.混勻后繼續(xù)培養(yǎng)，
       4.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài)，并更換為新鮮培養(yǎng)基，
       5.轉(zhuǎn)染1周后，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，中途可以換液，保持細(xì)胞的活性。