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菌種的復(fù)蘇與傳代

發(fā)布時(shí)間:2021/12/8 9:34:16      閱讀次數(shù):890

 1.以無(wú)菌操作方式開啟凍干菌種管,加入適量培養(yǎng)液(按菌種選擇培養(yǎng)液,如細(xì)菌選擇營(yíng)養(yǎng)肉湯、白色念珠菌選擇沙堡液體培養(yǎng)基、分枝桿菌選擇蘇通綜合液體培養(yǎng)基、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基),吹吸數(shù)次,使菌種融化分散。取含5.0 mL~10.0 mL相應(yīng)培養(yǎng)液的試管,滴入少許菌種懸液,在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間(一般為36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h~24 h、黑曲霉菌為30 ℃± 1℃培養(yǎng)42 h~48 h),此為第1代培養(yǎng)物。

  2.用接種環(huán)取第1代培養(yǎng)物,或從菌種凍存管中取適量菌液/瓷珠,劃線接種于相應(yīng)培養(yǎng)基平板(按菌種選擇培養(yǎng)基,如細(xì)菌選擇營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、白色念珠菌選擇沙堡瓊脂培養(yǎng)基、分枝桿菌選擇改良羅氏培養(yǎng)基或其他商品化分枝桿菌專用復(fù)合瓊脂培養(yǎng)基、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏瓊脂培養(yǎng)基),在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間(一般為36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h~24 h、分枝桿菌36 ℃± 1℃培養(yǎng)72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培養(yǎng)42 h~48 h),此為第2代培養(yǎng)物。

  3.挑取第2代培養(yǎng)物中典型菌落,接種于相應(yīng)培養(yǎng)基斜面或平板(按菌種選擇培養(yǎng)基斜面,如細(xì)菌選擇營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面、白色念珠菌選擇沙堡瓊脂斜面、分枝桿菌選擇改良羅氏培養(yǎng)基或其他商品化分枝桿菌專用復(fù)合瓊脂斜面、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏瓊脂培養(yǎng)基平板),在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間(一般為36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h~24 h、分枝桿菌36 ℃±1 ℃培養(yǎng)72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培養(yǎng)42 h~48 h),此為第3代培養(yǎng)物。

  4.取第3代培養(yǎng)物,接種于相應(yīng)培養(yǎng)基斜面,在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間,此為第4代培養(yǎng)物。5.1.5 按上述方法培養(yǎng)至所需代數(shù),傳代時(shí)在試管上注明菌種名稱、菌種號(hào)、代數(shù)及傳代日期等基本信息。

  本文節(jié)選自中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《WS/T 683—2020消毒試驗(yàn)用微生物要求》


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