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pExpress-1-Fcer2（rat）質(zhì)粒的操作流程

發(fā)布時間：2021/12/8 10:44:50 閱讀次數(shù)：461

pExpress-1-Fcer2(rat)質(zhì)粒
基本信息：
平臺編號：zl-052260
別稱: NM_001033924.1;CD23; Fcer2a
復制子: pUC
克隆菌株: DH5a
培養(yǎng)條件: 37度
操作流程
pExpress-1-Fcer2(rat)質(zhì)粒譜圖到貨后請根據(jù)標簽上文字判斷產(chǎn)品屬性（質(zhì)粒/甘油菌）
1、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min，再加入20μl無菌水溶解質(zhì)粒，室溫放置1min；
2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標記；
3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min；
4、42℃熱激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；
6、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀；
7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；
8、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h；
9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒。
目前保存各類載體資源超過20000余種，質(zhì)粒微生物約5000株，另外我們還代理國外微生物菌種資源，如addgene，安捷倫，thermo，atcc等。