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流感病毒檢測(cè)方法大匯總

發(fā)布時(shí)間：2021/12/8 11:04:41 閱讀次數(shù)：480

流感病毒在病毒分類(lèi)學(xué)上屬于正黏病毒科，其遺傳物質(zhì)由8個(gè)大小不等的獨(dú)立單股負(fù)鏈RNA片段組成，共編碼10個(gè)蛋白。其特點(diǎn)是容易發(fā)生變異。分為甲乙丙三型，其中甲型流感病毒經(jīng)常發(fā)生抗原變異，可感染人和多種動(dòng)物，常引起大流行和中小流行。乙型流感病毒變異較少，可感染人類(lèi)，引起爆發(fā)或小流行。丙型較穩(wěn)定，可感染人類(lèi)，多為散發(fā)病例。目前流感病毒在世界時(shí)有暴發(fā)流行，因此建立科學(xué)快速的診斷方法顯得尤其重要！

圖1：透射電鏡下的流感病毒（175000X）

目前流感病毒的常用檢測(cè)方法檢測(cè)方法主要有病毒分離鑒定、血清學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。

病毒的分離鑒定

病毒分離是流感病毒檢測(cè)的傳統(tǒng)方法之一，包括雞胚接種和細(xì)胞培養(yǎng)。目前分離流感病毒主要應(yīng)用馬達(dá)犬腎細(xì)胞（MDCK）為宿主系統(tǒng)。流感病毒的檢測(cè)時(shí)間一般需要4-5天。

免疫學(xué)檢測(cè)方法

血清學(xué)診斷

主要是檢測(cè)患者血清中的抗體水平，即用已知的流感病毒抗原來(lái)檢測(cè)血清中的抗體。血清抗體檢測(cè)方法不能在感染初期抗體還未產(chǎn)生或低于檢測(cè)濃度時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。

抗原檢測(cè)

病毒抗原的檢測(cè)的方法主要有兩類(lèi)：直接熒光抗體檢測(cè)和免疫膠體金層析方法。直接熒光抗體檢測(cè)方法是應(yīng)用熒光色素標(biāo)記抗體分子后，再與標(biāo)本中特異性抗原結(jié)合，用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的病毒抗原及其存在的位置。免疫膠體金層析技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便，無(wú)需任何專(zhuān)用儀器；檢測(cè)結(jié)果直觀，方便基層單位和現(xiàn)場(chǎng)使用。

病毒核酸檢測(cè)

常用的方法有核酸雜交、逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)、多重逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)、酶聯(lián)免疫PCR、實(shí)時(shí)定量。PCR、依賴(lài)性核酸序列擴(kuò)增、熒光PCR等方法。近年來(lái)，應(yīng)用基因芯片對(duì)流感病毒進(jìn)行檢測(cè)和分型是研究的一大熱點(diǎn)，可以同時(shí)檢測(cè)多種病毒，尤其適用于流感多亞型、易變異的特點(diǎn)。但這種方法對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較高，核酸檢測(cè)的普遍優(yōu)點(diǎn)在于具有檢測(cè)速度快、特異性強(qiáng)、易于操作的特點(diǎn)。