什么是人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞?
人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,也稱為Human Umbilical Vein Endothelial Cells(簡稱HUVEC),是從新生兒的臍帶靜脈中分離出來的一種細(xì)胞類型。這些細(xì)胞在血管內(nèi)皮細(xì)胞實驗和研究中占有重要地位,尤其是在心血管疾病的研究中。
來源與特性
來源:HUVEC來源于新生兒的臍帶組織,容易獲取,沒有倫理爭議,且便于提取足量細(xì)胞。
特性:這些細(xì)胞具有干細(xì)胞的潛能,理論上可以進(jìn)行多次傳代。它們清晰地顯示出包括細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和毛細(xì)血管在內(nèi)的基本元素,有助于進(jìn)行直接檢查,診斷疾病和治療發(fā)病原因。
主要作用
控制血液粘度:HUVEC的主要作用是控制血液的粘度,同時維持血管的正常功能。
促進(jìn)炎癥和幫助保護(hù)血管:這些細(xì)胞還有助于促進(jìn)炎癥,幫助保護(hù)血管免受毒素的損害,使血管表面的膜保持活性和彈性。
應(yīng)用
心血管疾病研究:HUVEC在心血管疾病的研究中廣泛應(yīng)用,如低氧、炎癥、氧化應(yīng)激、感染反應(yīng)以及腫瘤相關(guān)血管生成等研究。
血管形成實驗:在體外皮膚傷口愈合、心臟組織工程修復(fù)等研究中,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞也常被用于血管形成實驗。
藥物篩選和藥物作用機(jī)制研究
為什么要永生化?
HUVEC的永生化處理是出于多種研究和應(yīng)用需求。
解決實驗取材困難:原代HUVEC在體外培養(yǎng)中傳代次數(shù)有限,容易老化,且獲取這種細(xì)胞樣本的過程可能具有挑戰(zhàn)性。永生化處理能夠解決這一問題,使得細(xì)胞能夠無限次地傳代,且保持原代細(xì)胞的活力和特性。
維持細(xì)胞活力和特性:雖然原代經(jīng)過永生化處理的細(xì)胞理論上能夠多次傳代,但在傳代過程中也容易發(fā)生老化,經(jīng)過永生化處理的HUVEC,能夠大大增加細(xì)胞傳代次數(shù),仍保持原代細(xì)胞的活力和特性,沒有腫瘤化生長趨勢。
節(jié)省研究經(jīng)費(fèi):永生化細(xì)胞的建立為國內(nèi)開展相關(guān)研究節(jié)省了大量經(jīng)費(fèi),因為實驗人員不再需要頻繁地獲取新的原代細(xì)胞樣本。
促進(jìn)科學(xué)研究的進(jìn)展:通過提供穩(wěn)定的、無限次的細(xì)胞來源,永生化處理使得研究人員能夠更深入地研究內(nèi)皮細(xì)胞的功能、生理和病理過程,從而促進(jìn)相關(guān)科學(xué)研究的進(jìn)展。
綜上所述,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的永生化處理對于解決實驗取材困難、維持細(xì)胞活力和特性、擴(kuò)大應(yīng)用領(lǐng)域、節(jié)省研究經(jīng)費(fèi)以及促進(jìn)科學(xué)研究進(jìn)展等方面都具有重要意義。
怎么養(yǎng)好永生化HUVEC?
實驗室自主建系的永生化HUVEC是一種通過SV40病毒轉(zhuǎn)化獲得的細(xì)胞系,來源于人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞。這種細(xì)胞系具有永生化特性,即在特定條件下可以無限次地分裂和增殖。然而,盡管它們是永生化的,但在某些條件下仍然可能表現(xiàn)出有限傳代細(xì)胞系的特點(diǎn)。
以下是關(guān)于永生化人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞有限傳代細(xì)胞系的一些關(guān)鍵信息:
細(xì)胞來源:人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,通過SV40病毒轉(zhuǎn)化獲得永生化特性
細(xì)胞特性:貼壁生長。
·在最佳條件下可穩(wěn)定傳代20代以上。
·對消化敏感,需要精細(xì)控制消化操作。
·對培養(yǎng)基要求高,需使用內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)體系。
有限傳代的特點(diǎn):
·盡管是永生化的細(xì)胞系,但在某些條件下(如培養(yǎng)條件不佳、傳代次數(shù)過多等)可能會表現(xiàn)出傳代次數(shù)有限的特性。大量客戶反饋,收到細(xì)胞后自行培養(yǎng),10代以內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)均良好,能夠自主進(jìn)行保種,保證實驗順利完成。
·隨著傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞的生長速度、形態(tài)和功能可能會發(fā)生變化。
培養(yǎng)條件:
·內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
·培養(yǎng)環(huán)境:空氣95%,二氧化碳5%,溫度37℃
注意事項:
·由于細(xì)胞貼壁較弱,運(yùn)輸和操作過程中需特別注意避免低溫、震蕩和長時間室溫靜置。
·消化時務(wù)必精細(xì)控制,避免對細(xì)胞造成損傷。選用合適的培養(yǎng)基是確保細(xì)胞正常生長的關(guān)鍵。
·本株細(xì)胞由建系,在培養(yǎng)過程中存在細(xì)胞正常凋亡現(xiàn)象,可換液去除。
內(nèi)皮專用培養(yǎng)基,經(jīng)實驗室多次驗證,能夠保證HUVEC保持良好生長狀態(tài)!
綜上所述,永生化人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞雖然具有永生化的特性,但在某些條件下仍可能表現(xiàn)出有限傳代細(xì)胞系的特點(diǎn)。因此,在培養(yǎng)和使用這些細(xì)胞時,需要特別注意培養(yǎng)條件和操作細(xì)節(jié),以確保細(xì)胞的正常生長和實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。