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細胞培養(yǎng)的準備工作

發(fā)布時間：2023/6/14 9:06:37 閱讀次數(shù)：829

細胞培養(yǎng)的準備工作,細胞培養(yǎng)已經(jīng)發(fā)展成了一項多元化技術,各種培養(yǎng)技術如雨后春筍般出現(xiàn),并被廣泛應用于基礎研究診斷醫(yī)學生物技術等領域.在細胞培養(yǎng)過程中,最基礎最重要的還是無菌技術,我們將從以下2個方面與大家分享細胞培養(yǎng)要注意的一些無菌技術.

一無菌環(huán)境

  1 層流柜：這些年來,由于層流柜過濾空調機的引入,已經(jīng)為細胞培養(yǎng)創(chuàng)造出了更簡單更可靠的無菌環(huán)境,在層流柜內工作的主要優(yōu)點是：可提供持續(xù) 穩(wěn)定的過濾氣流通過工作臺面,避免工作空間受到灰塵污染.
在使用層流柜進行細胞培養(yǎng)時,要定期對過濾器進行維護檢查,一般情況下,每3-6個月檢查一次初效過濾器,每6個月檢查一次高效過濾器.初效過濾器可以在關掉風機后,拆卸清洗或者更換新的初效過濾器；高效過濾器要對氣流情況和孔數(shù)進行周期性的監(jiān)測,若高效過濾器需要更換,最好由專業(yè)的工程師來完成.
    2 操作臺：作為細胞培養(yǎng)實驗的主要“戰(zhàn)場”,必須保持干凈整潔.每次實驗前要用70%乙醇充分擦洗工作臺面,移入操作臺的每個物品,均要用70%乙醇進行擦拭消毒；實驗中若有溢出物,應立即擦去,并用70%乙醇擦拭該區(qū)域；實驗后,移除所有物品并再次擦洗操作臺.還要定期打掃操作臺下方空間,建議每周至少一次.
  3 其他：操作細胞培養(yǎng)物,要注重個人衛(wèi)生,穿戴個人防護設備,既可保護操作者不受培養(yǎng)物帶來的傷害,也可保護培養(yǎng)物免受操作者帶來的污染.無塵服可以降低皮屑及衣服上污物和灰塵污染培養(yǎng)物的可能.手套可以降低接觸敏感性,為操作者提供保護,并且比裸露的皮膚更容易保持清潔,在接觸和使用共用設備時,手套的無菌性會大大降低,所以要經(jīng)常用70%乙醇擦拭.

二無菌操作

1 在細胞實驗開始前,用70%乙醇擦拭工作臺表面和將要放入工作臺的所有物品,擦拭時,有時會擦掉物品表面的標記,所以要使用抗乙醇的記號筆.
2 切勿碰觸吸管尖頭部位以及容器瓶口,不要在開口容器的正上方進行實驗.容器打開后,將瓶身傾斜約45°角取用,盡量不要把瓶蓋蓋口朝上放置在工作臺面上,避免瓶蓋被污染.
3 每次操作只處理一株細胞株,避免不同細胞株之間出現(xiàn)交叉污染.
4 不可直接將液體從一個無菌容器中倒入另一個無菌容器,因為在倒液過程中,會在試劑瓶內外兩側之間形成一個液體橋,有可能會使污染物進入試劑瓶內.細胞培養(yǎng)的準備工作