柱式病毒 DNA-RNA 雙提取試劑盒是在基因柱式病毒 DNAOUT 的基礎上開發(fā)的、專門用于從血清(血漿)等液體樣品及拭子（咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、陰道拭子等）中提取微量病毒 DNA和 RNA 的產(chǎn)品，它具有下列特點：
1. 本產(chǎn)品可用于病毒 RNA、病毒 DNA 提取以及 DNA 和 RNA 雙提取。
2. 操作簡單，整個過程只需要 20 分鐘左右。
3. 靈敏度高，通過 PCR 檢測到的最終靈敏度可以達到 30-50 拷貝/mL。
4. 安全無毒，不需要使用苯酚和氯仿等有機溶液。
5. 與 PCR 和熒光 PCR 兼容。所得 DNA 可用于 PCR、酶切等實驗；RNA 可用于RT-PCR 和 Northern 雜交等實驗。
6. 價廉物美，性價比遠高于國外同類產(chǎn)品。
7. 適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細胞上清液等無細胞材料。
1. 對于液體病毒樣品：在 1.5 mL 離心管中加入 0.1-0.2 mL 液體病毒樣品。如
果病毒需要富集，可以將 1.5 mL 液體在 4℃ 24,000 g 冷凍離心 60 分鐘，移
棄1.3 mL 后剩下的 0.2 mL 用于第 2 步處理。
對于拭子樣品：將一個拭子放入離心管中，加入 1mL 自備的生理鹽水，振蕩器
上充分振蕩半分鐘后轉(zhuǎn)移 0.2 mL 到 1.5 mL 塑料離心管中，用于第 2 步處理。
2. 加入 0.6 mL 溶液 A 到第一步得到的 0.2 mL 樣品中，振蕩 30 秒混勻后室溫
放置 10 分鐘。注意：溶液 A 在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在
65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 加入 0.8mL 上柱結(jié)合液到離心管中，顛倒混勻后轉(zhuǎn)移一半的混合液（0.8mL）
到離心吸附柱中，室溫放置 2 分鐘。
4. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集
管中。
5. 將剩余溶液短暫離心后全部轉(zhuǎn)移到步驟 3 的離心吸附柱中，室溫放置 2 分鐘。
6. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收
集管中。
7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000 rmp 室溫離心 1 分鐘，棄
收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。
8. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘（干甩），棄含穿透液的離心管。
9. 將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的 RNase-free 的 1.5 mL 離心管中，在
離心吸附柱的濾膜的中部加入 30-100 μL 洗脫液，然后室溫放置 2 分鐘。
10. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘，離心管中的溶液即為病毒 DNA 和 RNA 溶液。
11. 所得溶液可以直接用于 PCR、RT-PCR 等實驗，也可放-20℃長期保存?zhèn)溆谩?/div>
疑難解答：
Q：提取液體樣品/病毒核酸(RNA 或 DNA)為何很難？
A：原因一是量少。病毒顆粒中的 RNA 或 DNA 是作為遺傳物質(zhì)保存，每個病毒最多
只攜帶幾個拷貝(而一個細胞中有上萬種 RNA 分子，每種 RNA 有很多拷貝)，同時
其長度也十分有限(一般不到細胞基因組的萬分之一)，樣品中病毒數(shù)往往又不是很
多，使得樣品中病毒核酸的絕對量往往比一個細胞中核酸的絕對量還少，所以操作
中十分容易丟失。另外，由于得到的核酸絕對量很少，不能使用電泳和測 OD 檢
測，只能通過 PCR 或 RT-PCR 檢測，而 PCR 或 RT-PCR 的條件又需要優(yōu)化，所
以要確定提取是否成功十分不容易。
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