產(chǎn)品及特點
內(nèi)毒素(即lipopolysaccharides,LPS)是E.coli細(xì)胞壁的主要成分,傳統(tǒng)的去除內(nèi)毒素的方法是將內(nèi)毒素和DNA一起純化出來,然后再用各種方法去除其中的內(nèi)毒素,操作繁瑣,DNA回收率低。本產(chǎn)品可以直接把E.coli表面的內(nèi)毒素去除, 從根本上避免了內(nèi)毒素對后續(xù)操作(如質(zhì)粒DNA提取,重組蛋白質(zhì)提。┑奈廴尽1井a(chǎn)品具有下列特點:
1.首個在菌體收集階段去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品,從源頭上避免了內(nèi)毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸,從根本上防止了可能產(chǎn)生的污染。
2.操作簡單快速,用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細(xì)菌表面的內(nèi)毒素,只需要10分鐘左右時間,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。
3.高效,能去除99%以上的內(nèi)毒素。
4.跟各種質(zhì)粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質(zhì)提取等操作兼容,DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA丟失率可以高達(dá)50%)。
5.不影響DNA和絕大部分蛋白質(zhì)的活性,處理過的質(zhì)粒DNA可用于轉(zhuǎn)染實驗。
6.既可小規(guī)模使用(在1.5 mL離心管內(nèi)),也可放量用于大規(guī)模無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA 提取和無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)純化。
使用及效果
將1.5-3 mL E.coli飽和菌液離心后棄上清,得到細(xì)菌沉淀,加入1 mL本產(chǎn)品溫和混勻后10000-12000 g離心1分鐘,棄上清(含內(nèi)毒素),重復(fù)上述操作2-3次, 得到的菌體可以直接進(jìn)入后續(xù)的質(zhì)粒DNA提取或蛋白質(zhì)提取程序。產(chǎn)品及特點
內(nèi)毒素(即lipopolysaccharides,LPS)是E.coli細(xì)胞壁的主要成分,傳統(tǒng)的去除內(nèi)毒素的方法是將內(nèi)毒素和DNA一起純化出來,然后再用各種方法去除其中的內(nèi)毒素,操作繁瑣,DNA回收率低。本產(chǎn)品可以直接把E.coli表面的內(nèi)毒素去除, 從根本上避免了內(nèi)毒素對后續(xù)操作(如質(zhì)粒DNA提取,重組蛋白質(zhì)提取)的污染。本產(chǎn)品具有下列特點:
1.首個在菌體收集階段去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品,從源頭上避免了內(nèi)毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸,從根本上防止了可能產(chǎn)生的污染。
2.操作簡單快速,用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細(xì)菌表面的內(nèi)毒素,只需要10分鐘左右時間,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。
3.高效,能去除99%以上的內(nèi)毒素。
4.跟各種質(zhì)粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質(zhì)提取等操作兼容,DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA丟失率可以高達(dá)50%)。
5.不影響DNA和絕大部分蛋白質(zhì)的活性,處理過的質(zhì)粒DNA可用于轉(zhuǎn)染實驗。
6.既可小規(guī)模使用(在1.5 mL離心管內(nèi)),也可放量用于大規(guī)模無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA 提取和無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)純化。
使用及效果
將1.5-3 mL E.coli飽和菌液離心后棄上清,得到細(xì)菌沉淀,加入1 mL本產(chǎn)品溫和混勻后10000-12000 g離心1分鐘,棄上清(含內(nèi)毒素),重復(fù)上述操作2-3次, 得到的菌體可以直接進(jìn)入后續(xù)的質(zhì)粒DNA提取或蛋白質(zhì)提取程序。
圖注:鱟試劑檢測結(jié)果。1號為內(nèi)毒素濃度為
0.1 EU/mL 的 鱟 試 劑 盒 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 ; 2號是稀釋500倍的、從未處理E.coli 中提取的質(zhì)粒DNA,內(nèi)毒素含量是380 EU/mL(=9.05 EU/ μg DNA);3號是稀釋了500倍的、從本產(chǎn)品處理過的E.coli中提取的質(zhì)粒DNA,內(nèi)毒素含量 是 6.5 EU/mL(=0.18 EU/ μg DNA);4 號 為鱟試劑盒標(biāo)中的無內(nèi)毒素水(陰性對照)(實驗編號:305078)。
圖注:左邊兩個質(zhì)粒DNA樣品是從用本產(chǎn)品處理后的E.coli中提取的,右邊兩個是從為未處理的E.coli中提取的。質(zhì)粒提取使用的是柱式質(zhì)粒DNAOUT,洗脫量是100 μL, 上樣量是10 μL。電泳染料為的綠如藍(lán)。處理過的細(xì)菌的質(zhì)粒DNA產(chǎn)率比沒處理的低10%左右(實驗編號:305070)。