蠟包埋組織本是珍貴的分子生物學(xué)研究材料,但是由于它們的保存時(shí)間一般都比較長,很不容易從中提取到高質(zhì)量的DNA,存在的主要問題是DNA的斷裂和脫蠟過程中樣品的丟失。產(chǎn)品是專門用于從甲醛和非甲醛固定的石蠟包埋組織中快提基因組DNA的試劑,具有下列特點(diǎn)
1. 一管式操作,避免了可能的交叉污染。
2. 含一步離心式脫蠟試劑,不需要使用有毒的二甲苯,健康環(huán)保。
3. 得到的提取物可以直接用于PCR反應(yīng)。
4. 得到的DNA的OD260/280一般在1.6左右,長度在0.4-25 Kb之間,可以直接作為PCR模板。
即開即用,客戶自己不需要準(zhǔn)備額外的試劑。
取1-3片厚度為10 μm石蠟包埋組織,加入1 mL溶液A振蕩混合10秒,加75 μL溶液B振蕩混合10秒,離心2分鐘,棄上層液體,真空干燥后加150 μL溶液C,55℃保溫過夜,95℃10分鐘,短暫離心后直接取1-2 μL樣品進(jìn)行PCR反應(yīng)。
用PCR比較本方法(1號和3號樣品)和Proteinase K/SDS法(2號和4號樣品)提取DNA的效果。材料為兩片10 mm的人淋巴節(jié)石蠟包埋組織,涌Proteinase K/ SDS法得到的DNA溶解于50 μL TE 中,1 μL用于PCR。用本產(chǎn)品提取的樣品PCR的用量為2 μL。1和2號的PCR片段長度為340 bp,3和4 號長度為540 bp。M為自產(chǎn)100bp DNA Ladder。