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耐熱型SYBR染料,電泳級(jí)

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 產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品是改良型的SYBR Green I,它跟常規(guī)的SYBR Green I相比檢測(cè)靈敏度相當(dāng),但具有耐熱、耐水解的特點(diǎn),所以十分穩(wěn)定,使用更加方便。

1. 穩(wěn)定,本產(chǎn)品濃縮液可以在常溫下存放一年以上,方便運(yùn)輸及保存。本產(chǎn)品的1×工作液在常溫下的半衰期為120多天,比常規(guī)的SYBR Green I(5天)長(zhǎng)20倍以上。

2. 使用方便多樣,既可以在制備凝膠時(shí)加入到融化的瓊脂糖凝膠中,還可以象常規(guī)的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar一樣用于電泳后染色。

3. 靈敏,其檢測(cè)靈敏度跟SYBR Green I相同,比EB靈敏200-100倍。

4. 低毒、環(huán)保、健康。

5. 可檢測(cè)各種核酸分子,包括dsDNA、ssDNA、RNA和Oligo。

6. 兼容性好,不但與常用的TAE、TBE和SuperBuffer-2等電泳緩沖液兼容,還  與常用的UV檢測(cè)系統(tǒng)和可見光激發(fā)檢測(cè)系統(tǒng)兼容。

7. 對(duì)DNA泳動(dòng)速度的影響小于常規(guī)的SYBR Green I。

半衰期長(zhǎng), 自然損耗低, 可多次使用, 使其相對(duì)使用成本比常規(guī)的SYBR Green I和其它非對(duì)稱花青類染料低

 

電泳中染色:將本產(chǎn)品按1:10000的比例加入到融化的瓊脂糖凝膠中制備凝膠,其余同常規(guī)操作,凝膠可以多次融化。

 

電泳后染色:將本產(chǎn)品按1:3000-1:4000的比例配制成染液,在塑料容器中 染色15-20分鐘,然后進(jìn)行UV檢測(cè)。染色液可以在常溫下閉光長(zhǎng)期保存,重復(fù)使用多次。

圖注:用本產(chǎn)品(1×)加入到瓊脂糖膠中并用微波爐融化五次、然后進(jìn)行常規(guī)DNA 電泳,樣品DNA為100bp分子量對(duì)照(最大片段為600 bp,最小片段為100 bp)。樣品1-8中每條DNA帶的量分別為150、75、35.5、15.8、7.9、3.95、

1.97、1 ng。照片是在300 nm紫外透射儀下用長(zhǎng)波綠色濾光片完成(如果使用254 nm紫外透射儀,效果會(huì)更好)

如何提高非對(duì)稱花青類染料(asymmetric cyanine stain)穩(wěn)定性? A:SYBR Green I和SuperSYBR都屬于非對(duì)稱花青類染料。第一代花青類染料在

有氧存在時(shí)很容易發(fā)生光氧化反應(yīng),十分不穩(wěn)定,需要保存在DMSO中。但是,可以通過(guò)下列方法提高其穩(wěn)定性。一是在分子中引入鹵素或氰基等吸電基團(tuán)來(lái)降低光氧化反應(yīng)活性,二是插入環(huán)羥基團(tuán)來(lái)增加分子的穩(wěn)定性,三是使用各種添加劑。SuperSYBR就是通過(guò)這些改良得到的產(chǎn)品。

 

 

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