本產(chǎn)品是基于RiboGreen熒光染料的超靈敏RNA定量檢測(cè)試劑盒。傳統(tǒng)的RNA檢測(cè)方法,利用260nm的光吸收來測(cè)定RNA濃度,靈敏度不高(4mg/mL RNA),而且檢測(cè)結(jié)果易受核苷酸、蛋白和RNA溶液中的鹽離子影響。與傳統(tǒng)方法相比較,本產(chǎn)品靈敏度顯著增強(qiáng),靈敏度可高達(dá)2.5 ng/mL,且RiboGreen熒光染料穩(wěn)定性更強(qiáng), 不受DNA、蛋白質(zhì)和鹽離子等物質(zhì)的干擾。
本產(chǎn)品具有如下特點(diǎn):
1. 適用范圍廣,可用于體外轉(zhuǎn)錄、Northern雜交分析、RT-PCR、差異顯示PCR、 S1核酸分析和RNase保護(hù)分析等實(shí)驗(yàn)。
2. 超高的靈敏度,RiboGreen 熒光染料靈敏度要比EB檢測(cè)法高出200倍,比260nm檢測(cè)法高出1000倍,能為客戶節(jié)省珍貴RNA的樣品。
3. RiboGreen染料處于溶液形式時(shí),幾乎沒有熒光特性,而當(dāng)RiboGreen染料與RNA結(jié)合時(shí),表現(xiàn)出較強(qiáng)熒光特性。RiboGreen-RNA復(fù)合物最大激發(fā)波長(zhǎng)為500nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為525nm。
4. 操作簡(jiǎn)單,使用方便,用戶不需要額外配制溶液。只需將染料工作液添加到樣品中,等待 5 分鐘即可讀取。
5. 與大多數(shù)熒光酶標(biāo)儀、熒光檢測(cè)儀器和熒光反應(yīng)兼容。
使用及效果
在每個(gè)樣品中加入等體積的2×Ribo Green工作溶液(配制步驟見產(chǎn)品使用手冊(cè)),充分混勻,避光于室溫下孵育2-5分鐘。將孵育好的溶液加入微量比色皿,使用熒光檢測(cè)設(shè)備檢測(cè)其熒光值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,得出樣品中RNA的含量。