Puromycin是來源于Streptomyces alboniger的一種氨基核苷類抗生素,中文名為嘌呤霉素,常用于篩選通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)
化、病毒感染等方法能表達(dá)pac基因(puror)的真核或原核多克隆或單克隆細(xì)胞。Puromycin不僅用于穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選,也用于穩(wěn)定細(xì)胞株的維持。本產(chǎn)品的10mg/ml包裝經(jīng)過濾除菌,可以直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。
Puromycin的特點(diǎn)是快速作用于細(xì)胞,一般2天內(nèi)可以殺死99%的不表達(dá)pac基因的細(xì)胞。
在革蘭氏陽性菌、動(dòng)物或昆蟲細(xì)胞中,嘌呤霉素通過抑制蛋白質(zhì)合成而抑制或殺死細(xì)胞。其作用機(jī)制為嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3'末端的類似物,能夠與核糖體的A位點(diǎn)結(jié)合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素與A位點(diǎn)結(jié)合后,不會(huì)參與隨后的任何反應(yīng),從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
Pac基因表達(dá)嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase),該基因是在Streptomyces alboniger中發(fā)現(xiàn)的。如果表達(dá)基因,就會(huì)對(duì)嘌呤霉素產(chǎn)生抗性,這一特性目前普遍應(yīng)用于篩選表達(dá)pac基因的哺乳動(dòng)物穩(wěn)定細(xì)胞株等。例如,很多商業(yè)化的慢病毒載體都攜帶pac基因(一般在質(zhì)粒圖譜上標(biāo)記為puror),從而利用嘌呤霉素篩選特定基因的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株。嘌呤霉素也可以用來篩選表達(dá)pac基因的大腸桿菌菌株、酵母菌株等。
化學(xué)性質(zhì)
化學(xué)名 | (2S)-2-amino-N-[(2S,3S,4R,5R)-5-[6-(dimethylamino)purin-9-yl]-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]-3-(4-methoxyphenyl)propanamide;dihydrochloride | |
化學(xué)式 | C22H29N7O5•2HCl | |
分子量 | 544.43 | |
CAS號(hào) | 58-58-2 | |
純度 | >98% |
本產(chǎn)品10mg/ml包裝配制在20mM HEPES(pH7.4)溶液中,濃度為10mg/ml,經(jīng)0.22μm濾膜過濾除菌,可以直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。本產(chǎn)品250mg包裝為粉末裝。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
ST551-10mg | Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素) | 10mg/ml×1ml |
ST551-50mg | Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素) | 10mg/ml×5ml |
ST551-250mg | Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素) | 250mg |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,至少一年有效。10mg/ml包裝避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng):
本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明:
細(xì)胞培養(yǎng)用青霉素-鏈霉素可以參考如下兩種方法之一使用:
1. 配制細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí)加入細(xì)胞培養(yǎng)用青霉素-鏈霉素,然后再過濾除菌:
配制細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí)按照青霉素的工作濃度為100U/ml,鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml進(jìn)行配制,配制完成后過濾除菌即可使用。
2. 配制青霉素-鏈霉素溶液(100X)母液,然后再添加到細(xì)胞培養(yǎng)液中:
按照青霉素的含量為10kU/ml,鏈霉素的含量為10mg/ml,配制青霉素-鏈霉素溶液(100X)母液。過濾除菌后即可按照100倍稀釋加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中使用。配制的母液可以-20℃凍存。