蛋白酶抑制劑混合物(植物樣品抽提用, 100X) (Protease inhibitor cocktail for plant cell and tissue extracts,100X) 是一種用于植物細(xì)胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物(200mM AEBSF, 10mM Bestatin, 3mM E64, 2mM Leupeptin, 2mM Pepstatin A and 500mM Phenanthroline in DMSO)。
植物細(xì)胞或組織提取物中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易導(dǎo)致提取物中的蛋白降解或去修飾,從而影響后續(xù)的蛋白檢測。因此在提取物中添加適當(dāng)?shù)牡鞍酌浮⒘姿崦傅纫种苿┦欠乐沟鞍捉到夂腿バ揎椀挠行Х椒ā?br />本產(chǎn)品為經(jīng)優(yōu)化和測試的用于植物細(xì)胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物,包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制劑、以及氨基肽酶抑制劑。具體組分與Sigma及Millipore同類產(chǎn)品的比較見表1。
表1. 蛋白酶抑制劑混合物(植物樣品抽提用, 100X)與Sigma及Millipore同類產(chǎn)品的比較:
品牌 | Beyotime | Sigma | Millipore |
產(chǎn)品編號 | P1015/P1016 | P9599 | 539133 |
產(chǎn)品形式 | 100X | 100X | 100X |
AEBSF | 200mM | 200mM | 200mM |
Bestatin | 10mM | 10mM | 10mM |
E64 | 3mM | 3mM | 3mM |
Leupeptin | 2mM | 2mM | 2mM |
Pepstatin A | 2mM | 2mM | 2mM |
Phenanthroline | 500mM | 500mM | 500mM |
本蛋白酶抑制劑混合物含200mM AEBSF, 10mM Bestatin, 3mM E64, 2mM Leupeptin, 2mM Pepstatin A, 500mM Phenanthroline (參考表1),配制在高純度DMSO中,無色或淺粉紅色。
本產(chǎn)品使用便捷,通常以1:100的比例把蛋白酶抑制劑混合物(植物樣品抽提用, 100X)加入裂解液中,即可用于植物細(xì)胞或組織蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
不同類型的蛋白提取物中含有不同類型的蛋白酶。例如,哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物中通常含有高豐度的絲氨酸蛋白酶,細(xì)菌細(xì)胞提取物通常含有較多的絲氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶,哺乳動(dòng)物組織提取物中主要含有絲氨酸、半胱氨酸和金屬蛋白酶,植物提取物中常含有大量的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶,還有一些含有天冬氨酸蛋白酶。為此針對不同類型樣品的蛋白提取,提供了不同類型的蛋白酶、磷酸酶等抑制劑混合物以供選擇,具體請參考附表1。
本產(chǎn)品可以有效抑制植物細(xì)胞或組織提取物中的各種蛋白酶活性,如絲氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨酸蛋白酶不可逆抑制劑,其抑制常數(shù)與PMSF和DFP的抑制常數(shù)相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作為PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩(wěn)定性更好。Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑;E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑;Leupeptin是絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制劑;Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶
可逆抑制劑;Phenanthroline是金屬蛋白酶的可逆抑制劑。各種抑制劑的具體信息請參考附表2。
一個(gè)包裝的本產(chǎn)品通常足夠用于100ml裂解液的配制。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
P1015 | 蛋白酶抑制劑混合物(植物樣品抽提用, 100X) | 1ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,一年有效。4℃保存,2個(gè)月有效;室溫保存,2周有效。
注意事項(xiàng):
本產(chǎn)品可以適當(dāng)分裝后保存,并應(yīng)在臨使用前添加到裂解液等適當(dāng)溶液中。
由于本產(chǎn)品中的金屬蛋白酶抑制劑Phenanthroline(菲咯啉)能與亞鐵等二價(jià)金屬離子形成紅色或紫色的螯合物,所以本產(chǎn)品可能呈現(xiàn)淺粉紅色;如果裂解液或樣品中含有較高濃度亞鐵等二價(jià)金屬離子,可能出現(xiàn)較深的紅色,但不影響使用。
本產(chǎn)品中含有的蛋白酶抑制劑對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1.本蛋白酶抑制劑混合物為100X的儲(chǔ)存液,使用時(shí)按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物),混勻后即可使用。含有蛋白酶抑制劑混合物的裂解液宜現(xiàn)用現(xiàn)配,不宜配制后凍存待后續(xù)使用。待所需的抑制劑添加完畢并混勻后,就可以開始進(jìn)植物細(xì)胞或組織的裂解和蛋白提取