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蛋白酶抑制劑混合物(真菌或酵母抽提用, 100X)

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 蛋白酶抑制劑混合物(真菌或酵母抽提用, 100X) (Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast extracts, 100X) 是一種用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物(100mM AEBSF, 1.5mM E64, 2.2mM Pepstatin A and 500mM Phenanthroline in DMSO)。

真菌或酵母提取物中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易導(dǎo)致提取物中的蛋白降解或去修飾,從而影響后續(xù)的蛋白檢測。因此在提取物中添加適當(dāng)?shù)牡鞍酌、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白降解和去修飾的有效方法?br />本產(chǎn)品為經(jīng)優(yōu)化和測試的用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物,包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制劑、以及金屬蛋白酶抑制劑。具體組分與Sigma及Millipore同類產(chǎn)品的比較見表1。
表1. 蛋白酶抑制劑混合物(真菌或酵母抽提用, 100X)與Sigma及Millipore同類產(chǎn)品的比較:

品牌 Beyotime Sigma Millipore
產(chǎn)品編號 P1020/P1021 P8215 539136
產(chǎn)品形式 100X 100X 100X
AEBSF 100mM 100mM 100mM
E64 1.5mM 1.4mM 1.5mM
Pepstatin A 2.2mM 2.2mM 2mM
Phenanthroline 500mM 500mM 500mM

本蛋白酶抑制劑混合物含100mM AEBSF, 1.5mM E64, 2.2mM Pepstatin A, 500mM Phenanthroline (參考表1),配制在高純度DMSO中。
本產(chǎn)品使用便捷,通常以1:100的比例分別把蛋白酶抑制劑混合物(真菌或酵母抽提用, 100X)加入裂解液中,即可用于真菌或酵母蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
不同類型的蛋白提取物中含有不同類型的蛋白酶。例如,哺乳動物細(xì)胞提取物中通常含有高豐度的絲氨酸蛋白酶,細(xì)菌細(xì)胞提取物通常含有較多的絲氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶,哺乳動物組織提取物中主要含有絲氨酸、半胱氨酸和金屬蛋白酶,植物提取物中常含有大量的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶,還有一些含有天冬氨酸蛋白酶。為此針對不同類型樣品的蛋白提取,提供了不同類型的蛋白酶、磷酸酶等抑制劑混合物以供選擇,具體請參考附表1。
本產(chǎn)品可以有效抑制真菌或酵母提取物中的各種蛋白酶活性,如絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨酸蛋白酶不可逆抑制劑,其抑制常數(shù)與PMSF和DFP的抑制常數(shù)相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作為PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩(wěn)定性更好。E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑;Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制劑;Phenanthroline是金屬蛋白酶的可逆抑制劑。各種抑制劑的具體信息請參考附表2。
一個包裝的本產(chǎn)品通常足夠用于100ml裂解液的配制。
包裝清單:

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
P1020 蛋白酶抑制劑混合物(真菌或酵母抽提用, 100X) 1ml
說明書 1份

保存條件:
-20℃保存,一年有效。4℃保存,2個月有效;室溫保存,2周有效。
注意事項:
本產(chǎn)品可以適當(dāng)分裝后保存,并應(yīng)在臨使用前添加到裂解液等適當(dāng)溶液中。
本產(chǎn)品中含有的蛋白酶抑制劑對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明:
1. 本蛋白酶抑制劑混合物為100X的儲存液,使用時按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物),混勻后即可使用。含有蛋白酶抑制劑混合物的裂解液宜現(xiàn)用現(xiàn)配,不宜配制后凍存待后續(xù)使用。待所需的抑制劑添加完畢并混勻后,就可以開始進(jìn)行真菌或酵母的裂解和蛋白提取。

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