儀器分光光度計(jì)介紹:
分光光度計(jì)則是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。在分光光度計(jì)中,將不同波長(zhǎng)的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí),便可得到與眾不同波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度。如以波長(zhǎng)(λ)為橫坐標(biāo),吸收強(qiáng)度(A)為縱坐標(biāo),就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線。利用該曲線進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的分析方法,稱(chēng)為分光光度法,也稱(chēng)為吸收光譜法。用紫外光源測(cè)定無(wú)色物質(zhì)的方法,稱(chēng)為紫外分光光度法;用可見(jiàn)光光源測(cè)定有色物質(zhì)的方法,稱(chēng)為可見(jiàn)光光度法。它們與比色法一樣,都以Beer-Lambert定律為基礎(chǔ)。 上述的紫外光區(qū)與可見(jiàn)光區(qū)是常用的。但分光光度法的應(yīng)用光區(qū)包括紫外光區(qū),可見(jiàn)光區(qū),紅外光區(qū)。
常用的波長(zhǎng)范圍為:
(1)200~400nm的紫外光區(qū)
(2)400~760nm的可見(jiàn)光區(qū)
(3)2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。
注意:
1、由于隨機(jī)誤差原因,比較法準(zhǔn)確度相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)曲線法要差一些,另外標(biāo)準(zhǔn)溶液與被測(cè)溶液濃度相差太大時(shí)有較大誤差。
2、顯色反應(yīng)與顯色條件