標本采集
對懷疑肺炎支原體感染的患者采集痰、咽拭子、鼻咽洗液和支氣管分泌物。立即送檢和接種。不能及時接種的標本,應放置4℃保存并于24小時內(nèi)接種。
培養(yǎng)條件
支原體的營養(yǎng)要求比一般細菌高,除基礎營養(yǎng)物質(zhì)外還需加入10%~20%人或動物血清以提供支原體所需的膽固醇和酵母。支原體的最適pH 7.8~8.0之間,低于7.0則死亡,但解脲支原體最適pH 6.0~6.5。支原體的培養(yǎng)37℃即可,當然,初次培養(yǎng)37℃,5%~10%CO2效果更好。人型,肺炎,24~48小時即可達到對數(shù)生長期。
培養(yǎng)方法
分離培養(yǎng)是支原體實驗室診斷的惟一方法。大多數(shù)支原體兼性厭氧,有些菌株在初分離時加入5%CO2生長更好。生長緩慢,在瓊脂含量較少的固體培養(yǎng)基上孵育2~3天出現(xiàn)典型的“荷包蛋樣”菌落(圓形,直徑10~16μm),核心部分較厚,向下長入培養(yǎng)基,周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。解脲支原體在含尿素和以硫酸錳為產(chǎn)氨指標的完全診斷培養(yǎng)基上生長良好,形成具有特征性的深棕色菌落。此外,支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養(yǎng)細胞中生長。
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