肌酸激酶CK催化三磷酸腺苷和肌酸,生成磷酸肌酸,后者很快全部水解為磷酸,此時(shí)三磷酸腺苷和二磷酸腺苷仍穩(wěn)定,加入鉬酸銨可生成磷鉬酸,可進(jìn)一步還原成鉬藍(lán),根據(jù)生成無機(jī)磷的量可算出酶的活力。
測(cè)定MAO主要用于研究肝硬化.肝硬化時(shí)MAO活性常明顯增高,陽性率可達(dá)80%以上.其活性與用腹腔鏡觀察肝臟表面結(jié)節(jié)形成的過程相平行,增高程度與組織學(xué)檢查肝臟的結(jié)蹄組織增生和小葉結(jié)構(gòu)的扭曲密切相關(guān).暴發(fā)性肝炎時(shí)由于本酶從壞死的肝細(xì)胞逸出可以增高,慢性肝炎活動(dòng)時(shí)有增高傾向.糖尿病、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn),肢端肥大癥,心力衰竭引起的肝瘀血等疾病也有增高傾向.
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
2、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.5%。
3、回收試驗(yàn): X =102%。
4、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
5、測(cè)試面廣:可測(cè)各種動(dòng)物血清(漿)、組織,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、紫外分光光度計(jì)(比色測(cè)定波長(zhǎng)為242nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和R1、R2
2、漩渦混勻,37℃孵育3小時(shí)
3、加入R3、R4, 抽提2分鐘,3500r/min離心10min
4、242nm波長(zhǎng),1cm光徑,比色