蘋果酸脫氫酶(Malate Dehydrogenase, MDH)催化的氧化還原反應(yīng)伴隨著340nm處吸光度的降低,通過(guò)測(cè)定每分鐘吸光度的變化來(lái)計(jì)算蘋果酸脫氫酶的活力。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
快速簡(jiǎn)便:速率法操作全程約5分鐘,可做5-10個(gè)樣本
穩(wěn)定性好:試劑盒-20℃冷凍保存6個(gè)月有效。
再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。
回收試驗(yàn): X =104%。
受外界影響因素。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物組織、培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)等,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為440nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、漩渦混勻器
4、微量移液器
所需儀器及自備試劑:
1、紫外分光光度計(jì)(比色測(cè)定波長(zhǎng)為340nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書。
操作流程:
1、按步驟加入1ml測(cè)定液漩渦混勻,37℃孵育3分鐘
2、加入樣本100μl, 20秒時(shí)340nm測(cè)出OD1
3、1分20秒時(shí)340nm測(cè)出OD2