用途:用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng),單增李斯特氏菌顯藍(lán)色,外圍有一不透明環(huán)
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用途:用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng),單增李斯特氏菌顯藍(lán)色,外圍有一不透明環(huán)
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基可快速檢測食品和藥品中單增李斯特氏菌。陰性結(jié)果可在 3 天內(nèi)檢測完成。單增李斯特氏菌顯藍(lán)色,菌落周圍有一不透明環(huán)。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑制除李氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。
成份 (g/L)
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
營養(yǎng)物質(zhì) | 70.0 |
顯色劑 | 1.0 |
pH 7.2 ± 0.2 25 ℃ |
李斯特氏菌添加劑 6.0g
李斯特氏菌抑菌劑 1 1ml*5 支
李斯特氏菌抑菌劑 2 1ml*5 支
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。
注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
用法
稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動,使其乳化均勻,將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時(shí),把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養(yǎng)基的厚度約為 5mm ,這樣有利觀察不透明環(huán)。
貯存
制備好的固體平板保存于 2-8 ℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
使用前,把制備好的培養(yǎng)基放置室溫 10-20 分鐘。
1 、按 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 GB 標(biāo)準(zhǔn)、 FDA 標(biāo)準(zhǔn)、 ISO 標(biāo)準(zhǔn)或其它標(biāo)準(zhǔn)制備樣品液;
2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養(yǎng) 48 小時(shí);或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混勻, 30 ℃培養(yǎng) 24 小時(shí)。
3 、取一環(huán)增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上, 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。
質(zhì)量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗(yàn)
在 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí):
質(zhì)控菌株 | ATCC | 生長情況 | 菌落顏色 | 不透明環(huán) |
單增李斯特氏菌 | 27853 | +++ | 藍(lán)色 | + |
綿羊李斯特氏菌 | +++ | 藍(lán)色 | + | |
西爾李斯特氏菌 | +++ | 藍(lán)色 | - | |
金黃色葡萄球菌 | 25923 | ++ | 黃色 | - |
大腸桿菌 | 25922 | - | - | - |
沙門氏菌 | - | - | - |
典型特征
單增李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 24-28 小時(shí), 平板上出現(xiàn)藍(lán)色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 48 小時(shí) ,平板上出現(xiàn)藍(lán)色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí), 平板上出現(xiàn)藍(lán)色菌落,菌落周圍沒有不透明環(huán)。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。
一、細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
二、細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
7. 視具體情況而定。
暫無數(shù)據(jù)
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