注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
中性、堿性土壤速效磷試劑盒可見分光光度法測定意義
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機態(tài)磷,土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一。
測定原理
用弱堿性提取堿溶性磷和吸附態(tài)磷,用鉬銻抗比色法測定。
自備實驗用品及儀器
天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、震蕩儀。
試劑組成和配制
提取液:液體55mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前加0.5mL蒸餾水溶解。
試劑二:液體 1mL×1 支,4℃保存。
工作液:臨用前將試劑一和試劑充分混勻,加48.5mL蒸餾水混勻。
樣本處理
新鮮土樣風干,過20目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:20的比例(建議稱取約0.05g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取1h,10000g ,25℃離心10min,取上清液待測。
測定操作表
| 空白管 | 測定管 |
樣本(mL) |
| 0.1 |
提取液(mL) | 0.3 | 0.2 |
工作液(mL) | 0.4 | 0.4 |
H2O(mL) | 0.3 | 0.3 |
充分混勻,25℃靜置30min | ||
于1mL玻璃比色皿,蒸餾水調(diào)零,測定700nm處吸光值 A,分別記為A空白管和A 測定管,△A=A測定管-A空白管 |
計算公式
標準曲線:y =0.237x-0.2018,R2=0.9992
速效磷含量(mg/kg)=(△A+0.2018)÷ 0.237×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 42.19×(△A+0.2018)÷W
V 反總:反應總體積,1mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.1mL;V 樣總:加入提取
液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g