注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
土壤全鐵試劑盒可見分光光度法測定意義
鐵元素是一種十分重要的植物營養(yǎng)元素,土壤中鐵含量直接影響著植物吸收利用以及生長代謝。
測定原理
在 pH2-9范圍內(nèi),鹽酸羥胺將三價(jià)鐵轉(zhuǎn)化為二價(jià)鐵,與鄰菲羅琳反應(yīng)生成橙紅色配合物,在510nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿。
試劑組成和配制
提取劑:粉劑×1 瓶,4℃保存。
提取液:液體 100mL×2 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干,過100目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取劑質(zhì)量(g)為 1:4 的比例(建議稱取約0.1g土樣,加入0.4g提取劑)緩慢加入提取劑于坩堝中,邊加邊攪拌均勻,然后在馬弗爐中550℃熔融10min,然后在920℃熔融30min,趁熱取出坩堝,將熔融物轉(zhuǎn)入燒杯,邊攪拌邊加4mL提取液,必要時(shí)加蓋,防止溶液濺出,溶解30min 后,5000g ,25℃離心10min,取上清液待測。
測定操作表
| 空白管 | 測定管 |
樣本(μL) |
| 100 |
試劑一(μL) | 100 | 100 |
試劑二(μL) | 300 | 300 |
試劑三(μL) | 200 | 200 |
H2O(μL) | 400 | 300 |
充分混勻,25℃靜置 20min | ||
于1mL玻璃比色皿,蒸餾水調(diào)零,測定510nm處吸光值 A,分別記為A空白管和A測定管, △A=A測定管-A空白管 |
計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.1569x -0.0173,R2=0.9992
全鐵含量(mg/kg)=(△A+0.0173)÷ 0.1569×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 254.94×(△A+0.0173)÷W
V 反總:反應(yīng)總體積,1mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.1mL;V 樣總:加入提取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g