注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
土壤有效硼測(cè)試盒測(cè)定意義
土壤中有效硼直接影響著植物的吸收和利用。
測(cè)定原理
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物,在 420nm 有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板。
試劑組成和配制
試劑一:液體 1mL×1 支,4℃保存。
試劑二:液體 8mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 4mL 蒸餾水溶解。
樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干,過 100 目篩,按照土壤質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為 1:2 的比例(建議
稱取約 0.5g 土樣,加入 1mL 蒸餾水)加入蒸餾水,沸水中浸提 10min,待自然冷卻,加入
50μ L 試劑一,震蕩 5min,8000g ,25℃離心 10min,取上清液待測(cè)。
測(cè)定操作表
空白管 測(cè)定管
樣本(μL) 40
試劑二(μL) 80 80
試劑三(μL) 40 40
H2O(μL) 80 40
充分混勻,25℃黑暗中靜置 1h
于微量石英比色皿/96 孔板,蒸餾水調(diào)零,測(cè)定 420nm 處吸光值 A,分別記為 A 空白
管和 A 測(cè)定管,△A=A 測(cè)定管-A 空白管
計(jì)算公式
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.3897x - 0.2359,R² = 0.9995
全硼含量(mg/kg)=(△A+0.2359)÷ 0.3897×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 51.32×(△A+0.2359)÷W
V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.04mL;V 樣總:加入提
取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g
b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.1949x - 0.2359,R² = 0.9995
全硼含量(mg/kg)=(△A+0.2359)÷ 0.1949×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
=102.64×(△A+0.2359)÷W
V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.04mL;V 樣總:加入提
取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng)
1. 配制好的試劑二 4℃保存不可超過 7 天。
2. 顯色時(shí)嚴(yán)格控制溫度并且避光,以免顯色劑見光分解。