拭子病毒采集和核酸保存及純化試劑盒用于冠狀病毒、流感病毒、手足口病毒、麻疹風(fēng)疹病毒等各種病毒相
關(guān)樣本的采集、運輸以及核酸的提取純化。能快速滅活病毒和酶的活性,保護病
毒的核酸在常溫下 4 天不降解,能從拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、陰道
拭子等)中提取微量病毒 DNA 和 RNA。它具有如下特點:
1. 一站式,含有樣品采集運輸所需要的拭子、保存液和保存管,可用于病
毒 RNA、病毒 DNA 提取以及 DNA 和 RNA 雙提取。
2. 含病毒快速滅活試劑,可以在數(shù)分鐘之內(nèi)滅活各種 DNA 病毒和 RNA
病毒,使之失去傳染性。
3. 含有高效酶滅活試劑,可以快速滅活包括 DNase 和 RNase 在內(nèi)的各
種酶,去除降解核酸的隱患。本產(chǎn)品保存液中的病毒已經(jīng)滅活,不能用于病毒培
養(yǎng)。
4. 含有特殊的核酸保護劑和穩(wěn)定劑,可以使釋放出來的病毒 DNA 和病毒
RNA 在常溫下 4 天內(nèi)無明顯的降解。
5. 可用于各種拭子的采集保存和運輸,包括口腔拭子、咽喉拭子、鼻腔拭
子、陰道拭子等等。
6. 保存的樣品可以在常溫運輸(4 天之內(nèi)),如果超過 4 天需要-20℃保
存和運輸。
7. 靈敏度高,通過 PCR 檢測到的最終靈敏度可以達到 30-50 拷貝/mL。
安全無毒,不需要使用苯酚和氯仿等有機溶液。
8. 與 PCR 和其他核酸擴增兼容,所得核酸可用于 PCR 等后續(xù)擴增實驗。
9. 本產(chǎn)品只能用于科研。
注意:盡管本試劑盒的保存液含有病毒滅活劑,但不能排除離心管外在取樣時污
染了病毒,因此操作人員必須按處理傳染性樣品的方法進行相應(yīng)的防護,必須在
合乎國家規(guī)定的實驗室進行所有操作。
一、病毒采集、運輸和保存
1. 采樣前,在采樣管(2mL 紅蓋管)的標簽上標注相關(guān)樣品信息。
2. 根據(jù)不同的采樣要求,用采樣拭子在相應(yīng)的部位和器官采樣。具體采樣方法
如下:
a) 鼻拭子:將拭子頭輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。
b) 咽拭子:用拭子擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁后退出。
c) 尿道采樣:對男性,用拭子插入尿道約 2cm 處旋轉(zhuǎn),靜止數(shù)秒后退出。對
女性,抹去宮頸口粘液,用拭子插入宮頸管 1-2cm 處后退出。
d) 其他拭子采樣:本手冊暫不詳述。
3. 迅速將拭子放入本采樣管中(含 0.6 mL 病毒保存液),將拭子在樣品管中
旋轉(zhuǎn) 15 秒。
4. 將采樣拭子在折斷處折斷,丟棄把柄端,旋緊管蓋。
5. 新鮮采集的標本應(yīng)在 4℃-25℃下 96 小時(4 天)內(nèi)運送至實驗室,未能 96
小時送至實驗室的,應(yīng)置于-70℃或以下保存,DNA 樣品也可以放-20℃保
存。
二、病毒核酸提取純化
注意:由于病毒有傳染性,因此實驗過程中的所有垃圾需要按有傳染性物質(zhì)處理。
操作人員也必須相應(yīng)做好防護
6. 如果離心管中的 0.6 mL 病毒保存液在低溫下凝固,則需要先在 37-65℃融
化。
7. 在融化的病毒保存液中加入 0.8mL 上柱結(jié)合液到離心管中,蓋上蓋子后顛
倒混勻,轉(zhuǎn)移一半的混合液(0.7mL)到離心吸附柱中,室溫放置 2 分鐘。
8. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到