7-AAD,英文全稱為7-aminoactinomycin D,中文名稱為7-氨基放線菌素D,是一種能夠染色核酸的遠(yuǎn)紅外熒光探針。7-AAD與DNA形成的復(fù)合物在546nm激發(fā)光下能夠產(chǎn)生647nm遠(yuǎn)紅外區(qū)的最大發(fā)射光。7-AAD的遠(yuǎn)紅外區(qū)發(fā)射光這一特性,使其常用于多重?zé)晒馊旧珜?shí)驗(yàn)中。
7-AAD和碘化丙啶(PI)類似,是一種非細(xì)胞膜通透性的熒光染料,不能通透具有生物活性的細(xì)胞膜,只能染色喪失細(xì)胞膜完整性的壞死細(xì)胞或被固定和通透處理后的細(xì)胞,常被用于熒光染色區(qū)分壞死細(xì)胞或者固定通透處理后的廣譜性染色。與碘化丙啶(PI)不同的是,7-AAD被546nm的氬離子激光激發(fā)后,其發(fā)射光譜較PI窄,且發(fā)射波長更長并在遠(yuǎn)紅外區(qū),對(duì)其它檢測通道的干擾更小,在多重?zé)晒馊旧珪r(shí)是PI的理想替代品,可與多種488nm激發(fā)光激發(fā)的熒光染料聯(lián)合使用,如FITC (異硫氰酸熒光素)、PE (藻紅蛋白)、APC (別藻藍(lán)蛋白)等,在600nm波長左右有較弱的熒光,可用普通的熒光顯微鏡檢測紅色熒光,而在遠(yuǎn)紅外區(qū)650nm波長左右有較強(qiáng)的熒光,可用流式細(xì)胞儀FL3通道或配備650nm長通濾光片的熒光顯微鏡檢測遠(yuǎn)紅外熒光。
7-AAD的分子式為C62H87N13O16,分子質(zhì)量為1270.45,CAS number為7240-37-1。染色DNA后的最大激發(fā)光波長為546nm,最大發(fā)射光波長為647nm。7-AAD的化學(xué)結(jié)構(gòu)式以及染色DNA后的激發(fā)光與發(fā)射光光譜參考圖1。
圖1.7-AAD的化學(xué)結(jié)構(gòu)式(圖A)以及與DNA形成的復(fù)合物的激發(fā)光譜與發(fā)射光譜(圖B)。
本產(chǎn)品提供1mg包裝,推薦使用DMSO配制成10mM的貯存液。7-AAD的使用濃度一般為1-10μM,孵育時(shí)間一般為15~60分鐘。為了達(dá)到最佳的染色效果,建議根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件和細(xì)胞或組織摸索染色濃度與染色時(shí)間。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
ST515-1mg | 7-AAD (7-氨基放線菌素D) | 1mg |
- | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃避光保存,至少一年有效。
注意事項(xiàng):
配制成溶液后如果有細(xì)菌或真菌污染,可能會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
細(xì)胞經(jīng)固定、通透和RNase處理后也可以使用7-AAD檢測細(xì)胞周期,但更常用的是碘化丙啶(PI)。
熒光染料均存在淬滅問題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。