1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品 DNA。
2. 根據(jù)鹿保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物，能專一性地檢測(cè)出樣品中的鹿成分，包括馬鹿、梅花鹿、坡鹿、水鹿和白唇鹿，但不能檢測(cè)其他動(dòng)物成分。
3. 熒光定量 PCR 檢測(cè)，既可以定量，也可以定性，比常規(guī)PCR 更加靈敏和靈活。
4. 快速，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程（按一個(gè)樣品計(jì)）所需時(shí)間僅為 2.0 小時(shí)。
5. 一管式閉管操作，降低了交叉污染。
6. 提供陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品，便于分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
7. 對(duì)混合樣品中鹿成分的檢測(cè)下限為 0.1%， 對(duì)樣品中鹿成分的核酸檢測(cè)下限為 1.0ng/µL。
8. 本只能用于科研，足夠 50 次 20μL 體系的熒光定量 PCR。
本產(chǎn)品參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB/T21106-2007 制備
| 成分 | 編號(hào) | 十孔盒包裝 |
| 2×qPCR MagicMix | 90408 | 0.5 mL（棕色） |
| 熒光PCR 專用模板稀釋液 | 180701 | 1 mL（黃蓋） |
| 鹿源性成分染料法PCR 引物混合液 | 14-112yw | 100 μL（白蓋） |
| 鹿源性成分染料法PCR 陽(yáng)性對(duì)照 （1×10E8 拷貝/μL） | 14-112pc | 50 μL（黃蓋） |
| 核酸釋放劑試用裝 | 61202 | 20 次（1mL，綠蓋） |
| 使用手冊(cè) | 13-510sc | 1 份 |
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較
高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)
準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供動(dòng)物樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供無(wú)傳染性的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，最好用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
2. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè)PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照，6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè)PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照（用第 4 號(hào)陽(yáng)性對(duì)照稀釋液，濃度為 10000 拷貝/μL）。下面只描述定量分析的步驟， 定性分析只是把 6 個(gè)標(biāo)曲反應(yīng)縮減成 1 個(gè)，其余不變。
3. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢
后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后最后加）
| 成分 | 樣品管 N+2 個(gè) | PCR 陰性 對(duì)照管 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線 樣品管（2-7 管） |
| 2×qPCR MagicMix | 各 10 μL | 10 μL | 各 10 μL |
| 鹿源型成分染料法PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
| 自備 10×ROX (見(jiàn)注) | 各 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
| N+2 個(gè)制備的 DNA 模板 | 各 6 μL | 不加 | 不加 |
| 超純水 | 不加 | 6 μL | 不加 |
| 第 7 步所得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品稀釋液 （2-7 號(hào)） |
不加 |
不加 | 各 6μL（2 號(hào)樣到 2 號(hào)管，3 號(hào)樣到 3 號(hào)管…） |
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用ROX 作為對(duì)照，其他熒光 PCR 儀器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX，則用水替代。
蓋上蓋子后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 qPCR（具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù) qPCR 儀器的不同而自行優(yōu)化）。
五、數(shù)據(jù)處理
11. 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè)，則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 DNA 濃度的log 值，再推算出其濃度。
12. 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè)，只判斷陽(yáng)性或陰性，則陰性對(duì)照 Ct 必須大于或等于 40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，有典型擴(kuò)增曲線，Ct 值應(yīng)該小于或等于30。對(duì)待測(cè)樣品，如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性，如果小于或等于 35 則為陽(yáng)性。如果在 35-40 之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于 40 則
為陰性，如果小于 40，則為陽(yáng)性。
