1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增 HIV-2 前病毒,與其他病毒沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊可以從本公司網(wǎng)站核酸釋放劑或產(chǎn)品編號(hào) 61202 下載。
如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在 200μL 水中加 10μL HIV-2 前病毒 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用 200μL 水。提取結(jié)束后最后得到 200μL 模板 DNA(每個(gè)樣品)
放冰上待用,溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL,否則 PCR 抑制物很可能會(huì)抑制 PCR。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
對 N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性對照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分