通用型全基因組擴(kuò)增試劑盒

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通用型全基因組擴(kuò)增試劑盒是用于基因組DNA擴(kuò)增全基因組的試劑盒，可以方便、簡(jiǎn)單、快速、經(jīng)濟(jì)的得到穩(wěn)定產(chǎn)量的基因組DNA擴(kuò)增樣品。本產(chǎn)品有如下優(yōu)點(diǎn)：

基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超強(qiáng)鏈取代能力。
可以擴(kuò)增基因組達(dá)上萬(wàn)倍，具有高產(chǎn)量和高保真性的特點(diǎn)。
可使用各種來(lái)源的樣品，包括全血，干血，發(fā)根，口腔粘膜刮液培養(yǎng)細(xì)胞，真菌和病毒等。
操作簡(jiǎn)便快捷，恒溫（30℃）反應(yīng)，無(wú)須PCR儀即可實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增。
產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗(yàn)，包括多重PCR、長(zhǎng)片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫(kù)構(gòu)建、單倍型分析、測(cè)序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異，

微衛(wèi)星差異，SNP，STR）等。

自備試劑

超純水（無(wú) DNA 和 DNase 污染）

運(yùn)輸及保存

低溫運(yùn)輸、-20℃保存, 有效期一年。

使用方法

本產(chǎn)品適用于純化好的基因組DNA。

一、堿變性（堿變性法一般好于熱變性法，推薦用戶使用）

在PCR 塑料管中加入不超過(guò) 2.5uL 純化好的基因組DNA 或用量在100pg-100ng之間。如果體積不足2.5uL,則用超純水補(bǔ)齊。最好同時(shí)做一個(gè)不加DNA模板的陰性對(duì)照。
加入等體積（2.5μL）變性液，輕柔吹打混勻。

室溫放置2-5分鐘。
加入5uLWGA中和液。此時(shí)樣品總體積為10uL。二、WGA反應(yīng)
在10uL DNA樣品中，加入10 μL的 WGA Mix，輕柔吹打混合均勻。
加入0.5 uL Phi 29 DNA聚合酶（10U/uL），輕柔吹打混合均勻。
30℃保溫3-12小時(shí)。最好使用PCR儀進(jìn)行30℃保溫并打開(kāi)熱蓋保溫。如果采用30℃水浴，最好在樣品管中加入30-50uL石蠟油以防水分蒸發(fā)，因為30℃長(zhǎng)時(shí)間的水浴也能使水分蒸發(fā)到管壁，從而改變反應(yīng)體系中各成分的濃度、降低WGA反應(yīng)效率。如果模板DNA量比較高，WGA三小時(shí)即可檢測(cè)到DNA擴(kuò)增。
65℃保溫10分鐘使phi29 DNA聚合酶滅活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好將其滅活以免干擾后續(xù)反應(yīng)。
立即取5-10 uL WGA反應(yīng)液進(jìn)行電泳檢測(cè)擴(kuò)增效果。
擴(kuò)增的DNA可以用于后續(xù)試驗(yàn)或當(dāng)冰箱長(zhǎng)期保存
用本產(chǎn)品擴(kuò)增 10 ng 純化好的藻基因組DNA，反應(yīng)體系為 10 μL，擴(kuò)增時(shí)間為 8 h。取 5 μL 樣品電泳，第一泳道為 Marker（最大片段為 15 Kb），第 2~5 泳道擴(kuò)增樣品的引物濃度分別為 100,200,300,400 μM。染料為綠如藍(lán)核酸染料
WGA 原理圖圓球表示phi 29DNA 聚合酶
短藍(lán)線表示隨機(jī)引物
棕色線表示新合成的DNA