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TdT末端轉(zhuǎn)移酶

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TdT末端轉(zhuǎn)移酶

 

 

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 價(jià)格(元) 說(shuō)明書(shū)
C5011 TdT末端轉(zhuǎn)移酶(Terminal Transferase) 500U 500
2,500U 2,000
末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)是一種不依賴于模板的DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子的3’羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為T(mén)dT的底物,加尾長(zhǎng)度可達(dá)5~300nt。該末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)分子量為58.3 kDa,無(wú)5’和3’核酸外切酶活性,反應(yīng)中加入Co2+可提高加尾效率。該酶廣泛用于DNA的3’末端添加同聚物、利用修飾堿基(如ddNTP,DIGdUTP)標(biāo)記DNA 3’末端、TdT介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記技術(shù)(細(xì)胞凋亡的原位檢測(cè))等試驗(yàn)。該酶經(jīng)檢測(cè)無(wú)DNA內(nèi)切酶和外切酶污染,不含RNase。

組分

組分名稱 數(shù)量
Terminal Transferase (20 U/μl) 25 μl/125 μl
10×TdT Buffer 1 ml
10 mM CoCl2 250 μl

應(yīng)用

  • 寡核苷酸或DNA 3’羥基末端標(biāo)記
  • DNA末端加尾(DNA tailing)
  • 5’-RACE
  • 合成同一種脫氧核苷酸的寡聚鏈

活性定義

37℃60分鐘內(nèi),催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3’羥基末端中所需的酶量定義為1個(gè)活性單位

1×TdT Buffer

100mM KCl, 30mM Tris-acera, 0.05% (v/v) Triton X-100 (pH 7.5 at 25 °C)

儲(chǔ)存

-20℃可保存3年。

熱失活

75°C 20min。

注意事項(xiàng)

1、適量EDTA可使Terminal Transferase的活性喪失。
2、金屬離子螯合劑,較高濃度的銨根離子、氯離子、碘例子和磷酸根離子均對(duì)Terminal Transferase活性具有抑制作用。
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