Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶為Bst 3.0 DNA 聚合酶和極其耐熱反轉(zhuǎn)錄酶 ThermoStable V RTase(耐受65°C)的混合品,該酶適用于RNA的LAMP反應(yīng)。與Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶相比,其反轉(zhuǎn)錄活性提高了近100倍,可以檢測低靈敏度的RNA分子。該酶在以RNA為模板的LAMP實(shí)驗中,做為推薦用酶,其擴(kuò)增能力高于Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶。除此外,Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶同樣可以進(jìn)行DNA模板的LAMP擴(kuò)增。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Bst DNA聚合酶性能比較 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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組分 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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應(yīng)用 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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酶含量 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
1μl的Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase中包含8 U的Bst 3.0 DNA Polymerase和50U的ThermoStable V RTase。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
LAMP引物設(shè)計與實(shí)驗指南 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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儲存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
-20℃可保存3年。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
實(shí)例 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
1. 應(yīng)用Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶(3901)和Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶(3805)以A549細(xì)胞RNA為模板,進(jìn)行SYBR Green法RT-LAMP擴(kuò)增,比較如下: | ||||||||||||||||||||||||||||||||
2. 分別用Bst 2.0 DNA 聚合酶(3801)、Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶(3901)和Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶(3805)以A549細(xì)胞RNA為模板,進(jìn)行RT-LAMP擴(kuò)增后,瓊脂糖凝膠電泳,M為DNA Marker 10000,比較如下: | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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