抗原修復(fù)緩沖液主要由H2O2-甲醇溶液、檸檬酸緩沖液組成。
高壓抗原修復(fù)試劑盒
產(chǎn)品簡介:
組織在制作過程中由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原,又由于熱作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來,為了解決上述的問題,利用化學(xué)試劑和熱作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復(fù)。檸檬酸鹽、EDTA、Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林固定液屏蔽的抗原重新暴露出來,同時又不會對抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準(zhǔn)確率。 抗原修復(fù)有多種方法,主要方法可簡要歸納為加熱修復(fù)和非加熱抗原修復(fù)兩大類。非加熱抗原修復(fù)方法包括酶消化、真空負(fù)壓、酸水解等方法。目前主要是酶消化法,酶消化是以化學(xué)的方法來打斷醛鍵,修復(fù)抗原。在免疫組織與免疫組織化學(xué)中,有時經(jīng)福爾馬林等醛基固定液過度固定的標(biāo)本,常會產(chǎn)生過量的醛基遮蓋抗原,影響一抗與抗原的結(jié)合。
高壓加熱法原理在于通過高壓、高熱來促進(jìn)醛基的斷裂,當(dāng)加熱至開鍋,該法常被用于較難修復(fù)的抗原。采用含水高壓煮沸法可增強(qiáng)福爾馬林的腦組織tau蛋白免疫反應(yīng)性。采用高壓加熱法可以很好的避免假陽性、假陰性,使免疫組化染色效果更 好。
產(chǎn)品組成:
編號 名稱 | IH0314 2×100ml | Storage |
試劑(A): H2O2甲醇溶液 | 100ml | RT |
試劑(B): 高壓抗原修復(fù)液 | 100ml | 4℃ |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、 蒸餾水
2、 PBS磷酸鹽緩沖液(0.01mol/L,pH7.2~7.4)
3、 恒溫箱
操作步驟(僅供參考):
切片脫蠟至水。
切片入H2O2甲醇溶液處理切片10min。
自來水洗,蒸餾水洗。
將切片浸入高壓抗原修復(fù)液中,連同容器一起放入高壓鍋中加熱至沸騰。蓋上壓力閥至噴汽后持續(xù)1~4min。
待修復(fù)液恢復(fù)至室溫,PBS清洗3次,按選好的免疫組化染色方法進(jìn)行染色。
注意事項:
由于組織固定方法和時間長短與強(qiáng)度不同,抗原修復(fù)所需的時間會有很大差異,實驗人員應(yīng)依據(jù)免疫染色的結(jié)果相應(yīng)的調(diào)整。
本品不含防腐劑,一經(jīng)開啟不宜4℃長期保存。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。
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