抗原修復(fù)緩沖液主要由H2O2-甲醇溶液、胰蛋白酶修復(fù)液組成。
組織在制作過(guò)程中,由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過(guò)程中不能將其顯示出來(lái),為了解決上述的問(wèn)題,利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來(lái)或修正過(guò)來(lái)的過(guò)程稱(chēng)為抗原修復(fù)。檸檬酸鹽、EDTA或Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林屏蔽的抗原重新暴露出來(lái),同時(shí)又不會(huì)對(duì)抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準(zhǔn)確率。
在熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)法出現(xiàn)之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋 白酶等酶類(lèi)的誘導(dǎo)的表位修復(fù)是常用的方法。Leagene 胰蛋白酶抗原修復(fù)試劑盒能暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理,抗原修復(fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí),可考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。按照每個(gè)片子需要10ml抗原修復(fù)液(1×)計(jì)算,100ml抗原修復(fù)液可以用于10個(gè)樣本的抗原修復(fù)。