JM110甘油菌,是收集生長(zhǎng)在對(duì)數(shù)期的JM110菌,加入含有甘油的細(xì)菌凍存液制備而成?梢灾苯觿澠桨寤蛐×、大量培養(yǎng)。本菌株存在Dam和Dcm甲基化缺陷,用本菌株擴(kuò)增的質(zhì)?梢杂糜趯(duì)相應(yīng)甲基化敏感的內(nèi)切酶的酶切。
JM110菌株由于甲基化酶基因Dam和Dcm的缺失,使得在該宿主菌中擴(kuò)增的質(zhì)粒DNA或噬菌體DNA(phagemid DNA)沒(méi)有發(fā)生相應(yīng)的甲基化修飾,因而能被某些對(duì)相應(yīng)甲基化修飾敏感的限制性內(nèi)切酶酶切。Dam甲基化酶識(shí)別DNA序列GATC上的腺嘌呤殘基并使其N-6位點(diǎn)上發(fā)生甲基化,而Dcm甲基化酶識(shí)別DNA序列CCAGG和CCTGG上的胞嘧啶殘基并使其C-5位點(diǎn)上發(fā)生甲基化。
JM110菌株的基因型為:rpsL (Strr) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 ∆(lac-proAB) [F´ traD36 proAB lacIq Z∆M15]。
JM110菌株具有鏈霉素抗性(Strr),并且在F´ episome上含有lacIq Z∆M15基因,可用于藍(lán)白斑篩選。
JM110菌株核酸酶表達(dá)水平較高,在利用其進(jìn)行質(zhì)粒擴(kuò)增時(shí),可使用生產(chǎn)的質(zhì)粒小量抽提試劑盒(通用型) (D0007S或D0007M)、質(zhì)粒中量抽提試劑盒(通用型) (D0020)或質(zhì)粒大量抽提試劑盒(通用型) (D0028)進(jìn)行質(zhì)粒抽提。
本菌株可以使用常規(guī)的LB培養(yǎng)基或SOC培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
D0361 | JM110甘油菌(Dam和Dcm甲基化缺陷菌株) | 200μl |
— | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,一年有效。-80℃可以長(zhǎng)期保存。
注意事項(xiàng):
使用本甘油菌時(shí)可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。在沒(méi)有結(jié)凍的情況下,菌體會(huì)逐漸沉淀至管底,請(qǐng)務(wù)必注意適當(dāng)混勻后使用。
為保證菌種純正,避免其它細(xì)菌污染,盡量先劃平板然后再挑單克隆菌落進(jìn)行后續(xù)操作。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。