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HNB變色染料

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產(chǎn)品描述:

羥基茶酚藍(lán)(HNB)指示染料,可與Mg2+形成復(fù)合物,為紫羅蘭色。在 LAMP反應(yīng)中由于大量焦磷酸鹽的形成,焦磷酸鹽將合掉Ma2+。使得HNB的顏色變?yōu)樘焖{(lán)色,因此該試劑可作為LAMP反應(yīng)的指示染料,陽性擴(kuò)增樣品為天藍(lán)色,而陰性仍然保持紫羅蘭色。HNB變色染料可與UDG LAMP防污染擴(kuò)增試劑盒搭配使用從而建立可視化檢測方法

使用方法:

1.該制品為凍干品形式,首次使用前使用0.2ml ddH2O溶解后使用,溶解后使用為50×濃度。溶解前可保存于室溫,溶解后制品要保存在-20以下。

2.參考UDG LAMP防污染擴(kuò)增試劑盒配制反應(yīng)體系在0.2ml EP反應(yīng)管中加入下述試劑

10xIsothermo Buffer(Mg2+ free)        2μl   

Bst6.0 DNA/RNA Polymerase(8U/μl)     0.5~1μl  

10mM dUTP Mixture                                           1.6μl  

溶解后的HNB染料(50x)              0.4μl  

100mM Mg2+                                                      1.2μl  

LAMP Primer Mix                                               1-2μl  

模板DNA or RNA                                               1μl  

ddH2O到總體積                    20μl  

3. 反應(yīng)體系配好后,置于60~65℃(首次實(shí)驗(yàn)采用60℃)進(jìn)行反應(yīng)30~60min。

存儲RT

注意事項

HNB搭配的最佳Mg2+濃度為6mM,即20μl 反應(yīng)體系中加入1.2μl Mg2+10mM)。

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