主要特征
1、比逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄酶更高的熱穩(wěn)定性,持續(xù)性和保真度,允許從高度結(jié)構(gòu)化或嚴(yán)格修飾的RNA進(jìn)行全長的端到端cDNA合成。
2、新的端對端模板轉(zhuǎn)換活性,其能夠在逆轉(zhuǎn)錄過程中連接RNA-seq或PCR接頭,并且不再需要單獨(dú)的RNA 3'-接頭連接步驟
3、不需要RNA連接酶,對模板量要求低,使得RNA-seq文庫構(gòu)建步驟簡化從而更高效。
產(chǎn)品描述:TGIRT-III RTnase 具有依賴于 DNA/RNA 雜交鏈的反轉(zhuǎn)錄酶活性,能快速合成 cDNA,該酶具有強(qiáng)的鏈轉(zhuǎn)換活性(Switch)。因此該酶可用于 tRNA、ncRNA、miRNA 等核酸分子的同步逆轉(zhuǎn)錄和加接頭(TGIRT template-switching reaction,用于 TGIRT-Seq)。TGIRT-III RTnase 具有極強(qiáng)的延伸性能,因此更易獲得全長的 cDNA。除此外,該酶具有的強(qiáng) switch 活性,使得可以利用 RNA 的 5’端帽結(jié)構(gòu)進(jìn)行SMART 建庫(SAMRT-Seq)。該酶的反應(yīng)溫度為 37-60°C,最佳反應(yīng)溫度為 50°C。
產(chǎn)品組分 | ||||||||||
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產(chǎn)品 應(yīng)用
鏈特異性轉(zhuǎn)錄組分析全細(xì)胞或無細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序非編碼 RNA 轉(zhuǎn)錄組測序RIP-seq, HITS-CLIP, irCLIP and CRAC通過高通量測序鑒定 RNA 堿基修飾RNA 結(jié)構(gòu)映射長 cDNA 的合成全基因組或靶向 RNA 結(jié)構(gòu)分析
失活:反應(yīng)結(jié)束后,向反應(yīng)體系中加入 1μl 的 5N NaOH,并置于 95°C 下加熱 3min,失活該酶。失活后加入 5N HCl中和高堿性條件。
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