Klenow片段(3´→5´ exo-)是DNA聚合酶I的N末端截短物,它保留了DNA聚合酶活性,但5´-3´ 核酸外切酶活性缺失。該酶進(jìn)一步經(jīng)點突變(D355A,E357A)去除了其 3´-5´的核酸外切酶活性。因此該DNA聚合酶無任何外切酶活性,僅包含了DNA聚合酶活性,廣泛用于標(biāo)記探針制備、cDNA 第二條鏈的合成等建庫試驗。 | ||||||||
包裝 | ||||||||
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*10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25 °C), 50 mM MgCl2, 10 mM DTT. 該酶兼容PCR Buffer和內(nèi)切酶Buffer。 | ||||||||
單位定義 | ||||||||
一個活力單位即在37°C條件下,30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。 | ||||||||
應(yīng)用 | ||||||||
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儲存 | ||||||||
-20°C可保存3年。 | ||||||||
失活 | ||||||||
75°C,20min失活。 |
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