1 適用范圍
有機磷類和氨基甲酸酯類 農(nóng)藥殘留速測試劑盒適用于檢測新鮮蔬菜中的有機磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量。
2 檢測依據(jù)
試劑盒使用方法依據(jù)國家標準GB/T 5009.199-2003 《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》。
3 試劑盒組成
| 序號 | 名稱 | 規(guī)格(100T) | 規(guī)格(200T) | 規(guī)格(500T) |
| 1 | 顯色劑 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
| 2 | 底物 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
| 3 | 膽堿酯酶 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
| 4 | 緩沖試劑濃縮液 | 1瓶 | 1瓶 | 1瓶 |
| 5 | 說明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
4 溶液配制
4.1緩沖溶液：取500 mL純凈水，加入5 mL緩沖試劑濃縮液，混勻備用，室溫保存；
4.2膽堿酯酶：無需配制，使用時直接取100 μL，4℃冷藏保存；
4.3顯色劑：無需配制，使用時直接取100 μL，4℃冷藏保存；
4.4底物：加入10 mL純凈水溶解，使用時直接取100 μL，4℃冷藏保存。
5 樣品提取
選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土等雜物后取樣。葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣品，果菜從不同個體的表皮處取樣。
葉菜取2克1 cm見方葉尖部分于樣品杯中，莖類及水果取3克1 cm見方表皮于樣品杯中；加入10 mL緩沖液，震蕩1-2 min；倒出提取液或過濾液，靜置2 min待測。
蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇、番茄汁液等樣品中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬菜浸提；一些含葉綠素較高的蔬菜時，也可采取整株（體）浸提的方法，減少色素干擾。
6 有機磷類和氨基甲酸酯類 農(nóng)藥殘留速測試劑盒操作步驟
6.1對照測試
在一支干凈試管中分別加入2.5 mL緩沖溶液，100 μL顯色劑，100 μL膽堿酯酶，混勻；37℃恒溫設備中放置10分鐘后加入100 μL底物，搖勻并立即倒入比色皿，用農(nóng)殘檢測儀進行對照測試。
6.2樣品測試
在另一支干凈試管中分別加入2.5 mL樣品提取液，100 μL顯色劑，100 μL膽堿酯酶，混勻；37℃恒溫設備中放置10分鐘后加入100 μL底物，搖勻并立即倒入比色皿，用農(nóng)殘檢測儀進行樣品測試。儀器根據(jù)測定結(jié)果顯示出抑制率。
操作提示：在加底物的環(huán)節(jié)中，可預先將底物加入比色皿中，待恒溫靜置10分鐘時間一到，馬上將反應管中的反應液倒入已經(jīng)加有底物的比色皿中，并迅速放入測試通道進行測試，這樣可以減少同時檢測多個樣品時因加底物時間過長而造成的誤差。
7 結(jié)果判定
以分光光度計測試時，于412 nm處測定吸光度值在3分鐘內(nèi)的變化，按以下計算公式算出抑制率：
抑制率（%）=[(△A0-△At)/ △A0]×100%
以農(nóng)殘檢測儀檢測時，其抑制率＞50%時檢測結(jié)果為陽性，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。對于陽性結(jié)果的樣品需要重復檢驗2次以上，如有必要，可用其他方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
8有機磷類和氨基甲酸酯類 農(nóng)藥殘留速測試劑盒注意事項
8.1酶活性要求：本試劑盒中酶正�；钚�△A0≥0.3，符合國標方法要求；
8.2使用：任何試劑應遵循使用一瓶配制一瓶原則，用前應搖勻，用完后才是用新試劑，防止變質(zhì)；
8.3試劑只出不入原則：從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次吸入瓶內(nèi)，以免交叉污染；
8.4對色素干擾嚴重的過濾液，可用活性碳脫色處理，過濾或離心后，取清液作為樣品提取液。
9 貯存條件與有效期
9.1保存：試劑盒應保存于4℃冰箱，保質(zhì)期12個月，常溫保存3個月；
