一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介1. 產(chǎn)品名稱:兔外周血巨噬細(xì)胞2. 組織來(lái)源:外周血3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105 cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶4. 細(xì)胞簡(jiǎn)介:兔外周血巨噬細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中首次提出外周血這一新概念。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來(lái)源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。本公司生產(chǎn)的兔外周血巨噬細(xì)胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105 cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。5. 培養(yǎng)基信息:RPMI-1640培養(yǎng)基,含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等我們推薦使用兔外周血巨噬細(xì)胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)兔外周血巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)基。二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片三、使用方法此細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長(zhǎng)期生存,請(qǐng)您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。3. 細(xì)胞傳代1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;2) 添加12mM利多卡因消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余利多卡因消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;3) 用吸管輕輕吹打混勻,按適當(dāng)?shù)拿芏戎苯咏臃N實(shí)驗(yàn)器皿,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);4) 待細(xì)胞完全貼壁后,直接用于實(shí)驗(yàn);每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。四、注意事項(xiàng)1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。5. 該細(xì)胞只可用于科研。備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考
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