1.產(chǎn)品名稱:小鼠胚胎干細(xì)胞
2.組織來源:囊胚
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
小鼠胚胎干細(xì)胞分離自囊胚胚胎組織;胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cell,ESCs,簡稱ES、EK或ESC細(xì)胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞,它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境,ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型。進(jìn)一步說,胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的全能性,能分化出成體動物的所有組織和器官,包括生殖細(xì)胞。ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),細(xì)胞核大,有一個或幾個核仁,胞核中多為常染色質(zhì),胞質(zhì)胞漿少,結(jié)構(gòu)簡單。體外培養(yǎng)時,細(xì)胞排列緊密,呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色,ES細(xì)胞呈棕紅色,而周圍的成纖維細(xì)胞呈淡黃色。細(xì)胞克隆和周圍存在明顯界限,形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清,細(xì)胞表面有折光較強(qiáng)的脂狀小滴。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣,多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細(xì)胞的直徑7 微米~18 微米,豬、牛、羊ES細(xì)胞的顏色較深,直徑12 微米~18 微米。胚胎干細(xì)胞與普通細(xì)胞有顯著差別,有其特定的生長特性和特定的標(biāo)志,例如堿性磷酸酶活性非常高,帶有胚胎階段特異性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA),人類胚胎干細(xì)胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標(biāo)志,這些特性和標(biāo)志均可以用于對胚胎干細(xì)胞進(jìn)行鑒定,除此之外,胚胎干細(xì)胞還可以在體外永久傳代,并保持正常核型。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層(MEF)上培養(yǎng)時,胚胎干細(xì)胞都能呈克隆性增殖,長期保持核型正常和穩(wěn)定,凍存解凍也不影響不分化的特性。另外,胚胎干細(xì)胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性,目前證明端粒酶與細(xì)胞衰老密切相關(guān),多數(shù)成熟細(xì)胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細(xì)胞與成熟細(xì)胞不同的重要特點,也可能是其復(fù)制生命期限遠(yuǎn)比體細(xì)胞長的原因。
5.方法簡介:
小鼠胚胎干細(xì)胞采用分離囊胚組織,去除胚胎透明帶、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng),胰酶消化傳代純化制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件 明膠(0.1%) 培養(yǎng)基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號 CM-M314 換液頻率 每2-3天換液一次; 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 短梭形、多角形 傳代特性 可傳5-8代左右 消化液 0.025%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%