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HSC-3人口腔鱗癌細(xì)胞(已通過STR)

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細(xì)胞來源

JCRB 

凍存條件

無血清凍存液(貨號(hào):C7001

細(xì)胞描述

HSC-3 細(xì)胞系是從一名 63 歲男性患者的舌鱗狀細(xì)胞癌起源的轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)腫瘤中建立的。從新鮮的外植腫瘤組織中收集遷移和增殖的上皮細(xì)胞并進(jìn)行傳代培養(yǎng),大多數(shù)報(bào)告表明,皮下接種到裸鼠體內(nèi)的人上皮腫瘤轉(zhuǎn)移是相當(dāng)罕見的。HSC-3 是一種人類口腔鱗狀癌細(xì)胞系,當(dāng)皮下移植到裸鼠體內(nèi)時(shí),它會(huì)在引流淋巴結(jié)中形成轉(zhuǎn)移灶。來自 HSC-3 的條件培養(yǎng)基已顯示可促進(jìn)血管生成,HSC-3 細(xì)胞具有顯著升高的生長(zhǎng)因子分泌水平。該細(xì)胞系的高度侵襲性特征使 HSC-3 成為研究轉(zhuǎn)移性鱗狀細(xì)胞癌的高引用模型。

本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 

培養(yǎng)備注

用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng)

T25 細(xì)胞到貨處理

觀察: 1、收到細(xì)胞后,請(qǐng)及時(shí)核對(duì)培養(yǎng)瓶上標(biāo)注的細(xì)胞名稱是否與訂購(gòu)的細(xì)胞名稱一致以及培養(yǎng) 瓶是否有破損或漏液等異常情況。

處理: 1、75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2、顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40x,100x,200x 各一張)前 三天照片為重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。

3、不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀 態(tài)。

4、收到細(xì)胞后,及時(shí)查看說明書是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細(xì)胞 的傳代方法操作。

貼壁:未超過 80%匯合度時(shí),將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留 5ml 完全培養(yǎng)基, 放入 37℃、5%CO2 孵箱培養(yǎng);超過 80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞 培養(yǎng)步驟。首次傳代,建議 1:2 傳代(兩個(gè) T25)。

(傳代時(shí)建議一瓶用原瓶里面的完全培 養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng)。)

特殊細(xì)胞注意事項(xiàng):個(gè)別細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過程中發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正,F(xiàn)象。 請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm 離心 5min,收集上清(后期對(duì)比培養(yǎng)使用),

沉淀加入胰酶 1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化 1-2 分鐘后,加 5ml 完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再 離心,棄上清,加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸。然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè) T25),補(bǔ) 充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (注意:如收到密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時(shí)要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)

 凍存細(xì)胞到貨處理
1、收到細(xì)胞后,檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等 問題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。
2、將細(xì)胞取出轉(zhuǎn)移至液氮或-80 度冰箱保存,建議盡早復(fù)蘇。
3、復(fù)蘇第一管如有活性狀態(tài)問題及時(shí)與我們聯(lián)系,會(huì)有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再?gòu)?fù)蘇第 二管。特別說明:未與我方聯(lián)系擅自復(fù)蘇第二管出現(xiàn)問題不予售后。
細(xì)胞復(fù)蘇 1、 從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3、棄上清,沉淀用 5ml 完全培養(yǎng)基重懸,接種 T25 培養(yǎng)瓶,于 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中 培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代 1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次:
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后 加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管 中,1000rpm 離心 5min;
3、棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè) T25), 補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
細(xì)胞凍存 1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后 加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管 中,1000rpm 離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入 1ml/支的富衡無血清凍存液(FH7001),混勻后加入凍存管中。 (如:凍一支,加入 1ml 無血清凍存液)
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80℃冰箱 存放 24 小時(shí)以上。 本庫(kù)的細(xì)胞系(株)僅用于科研工作。
 
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